Η ανοσοδοκιμασία χημειοφωταύγειας, CLIA είναι μια εξαιρετικά ευαίσθητη τεχνική ανοσοπροσδιορισμού.
1. Αρχή
Η ανοσοδοκιμασία χημειοφωταύγειας συνδυάζει την ειδικότητα της ανοσολογικής απόκρισης και την υψηλή ευαισθησία της χημειοφωταύγειας. Η βασική του αρχή είναι να συνδυάζει την ειδική ανοσολογική απόκριση μεταξύ αντιγόνου και αντισώματος με αντίδραση χημειοφωταύγειας. Συγκεκριμένα, το αντιγόνο στο δείγμα που θα ελεγχθεί συνδυάζεται με ένα συγκεκριμένο αντίσωμα για να σχηματίσει ένα ανοσοσύμπλεγμα. Στη συνέχεια, μέσω μιας σειράς χημικών αντιδράσεων, το ανοσοποιητικό σύμπλεγμα παράγει ένα σήμα χημειοφωταύγειας. Η ένταση φωταύγειας είναι ανάλογη με τη συγκέντρωση του προς δοκιμή αντιγόνου και το περιεχόμενο του προς δοκιμή αντιγόνου μπορεί να αναλυθεί ποσοτικά ανιχνεύοντας την ένταση φωταύγειας.
2. Κύρια εξαρτήματα
Αντισώματα: συμπεριλαμβανομένων των αντισωμάτων σύλληψης και των αντισωμάτων ανίχνευσης. Το αντίσωμα σύλληψης συνήθως στερεώνεται σε φορέα στερεάς φάσης για να συλλάβει το προς δοκιμή αντιγόνο. Το αντίσωμα ανίχνευσης συνδυάζεται με έναν δείκτη χημειοφωταύγειας για την ανίχνευση του αντιγόνου στο ανοσοσύμπλεγμα.
Φορέας στερεάς φάσης: όπως μικροπλάκες, μαγνητικά σφαιρίδια κ.λπ., που χρησιμοποιούνται για τη στερέωση του αντισώματος σύλληψης για τη διευκόλυνση της ανοσολογικής αντίδρασης και του διαχωρισμού και της πλύσης.
Δείκτης χημειοφωταύγειας: συνήθως μια ουσία που μπορεί να παράγει ένα σήμα φωταύγειας σε μια χημική αντίδραση, όπως λουμινόλη, εστέρας ακριδινίου κ.λπ. Ο δείκτης συνδυάζεται με το αντίσωμα ανίχνευσης για να παράγει ένα σήμα χημειοφωταύγειας μετά την ανοσολογική αντίδραση.
Σύστημα ανίχνευσης: περιλαμβάνει εξοπλισμό όπως ανιχνευτές φωταύγειας, οι οποίοι χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση της έντασης των σημάτων χημιφωταύγειας και τη μετατροπή τους σε αναγνώσιμες τιμές.
3. Χαρακτηριστικά
Υψηλή ευαισθησία: Μπορεί να ανιχνεύσει εξαιρετικά χαμηλές συγκεντρώσεις της υπό δοκιμή ουσίας, η οποία είναι συνήθως αρκετές τάξεις μεγέθους πιο ευαίσθητη από τις παραδοσιακές μεθόδους ανοσοπροσδιορισμού.
Ευρεία γραμμική περιοχή: Η περιεκτικότητα της ελεγχόμενης ουσίας μπορεί να μετρηθεί με ακρίβεια σε ένα ευρύ φάσμα συγκεντρώσεων χωρίς πολλαπλές αραιώσεις.
Ισχυρή εξειδίκευση: Με βάση την ειδική δέσμευση αντιγόνου και αντισώματος, είναι εξαιρετικά εκλεκτικό για συγκεκριμένες ουσίες δοκιμής.
Γρήγορη: Η διαδικασία ανίχνευσης είναι σχετικά γρήγορη και τα αποτελέσματα μπορούν γενικά να ληφθούν σε συντομότερο χρόνο.
Υψηλός βαθμός αυτοματισμού: Είναι κατάλληλο για την ανίχνευση δειγμάτων μεγάλης κλίμακας και μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε συνδυασμό με αυτοματοποιημένα όργανα για τη βελτίωση της αποτελεσματικότητας ανίχνευσης.
4. Περιοχές εφαρμογής
Κλινική διάγνωση: Χρησιμοποιείται για την ανίχνευση διαφόρων βιοδεικτών, όπως δείκτες όγκου, ορμόνες, δείκτες μολυσματικών ασθενειών κ.λπ., για να παρέχει σημαντική βάση για τη διάγνωση της νόσου, την παρακολούθηση της θεραπείας και την αξιολόγηση της πρόγνωσης.
Ανάπτυξη φαρμάκων: Χρησιμοποιείται για την παρακολούθηση της συγκέντρωσης του φαρμάκου, την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας και την έρευνα μεταβολισμού φαρμάκων.
Δοκιμές ασφάλειας τροφίμων: Ανίχνευση επιβλαβών ουσιών, υπολειμμάτων φυτοφαρμάκων, υπολειμμάτων κτηνιατρικών φαρμάκων κ.λπ. στα τρόφιμα.
Περιβαλλοντική παρακολούθηση: Ανίχνευση ρύπων και τοξικών ουσιών στο περιβάλλον.